2016年7月，Nature雜志題為“Chinese scientists to pioneer first human CRISPR trial”的報(bào)道稱，中國(guó)科學(xué)家將開(kāi)展全球首個(gè)CRISPR人體試驗(yàn)。四川大學(xué)華西醫(yī)院腫瘤學(xué)家盧鈾教授研究小組計(jì)劃利用CRISPR技術(shù)編輯的T細(xì)胞（敲除PD-1基因）治療化療、放療以及其它療法治療無(wú)效的轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌患者[1]。

同年11月，Nature的另一篇報(bào)道證實(shí)，2016年10月28日，盧鈾教授團(tuán)隊(duì)已將經(jīng)CRISPR編輯的T細(xì)胞注射到1例肺癌患者體內(nèi)，代表這一評(píng)估PD-1敲除T細(xì)胞治療晚期非小細(xì)胞肺癌的I期臨床試驗(yàn)（NCT02793856）邁出了重要一步[2]。

來(lái)源：Nature Medicine

2020年4月27日，在最新發(fā)表于Nature Medicine 雜志上的一篇論文中，盧鈾教授及其合作者公布了該試驗(yàn)的結(jié)果[3]。

試驗(yàn)共招募了22例患者，12例患者接受了治療，11例患者臨床活性可評(píng)估（1例患者提前退出了研究）。主要終點(diǎn)是安全性和可行性，次要終點(diǎn)是有效性。

表1 治療相關(guān)不良事件總結(jié)

來(lái)源：Nature Medicine

研究結(jié)果顯示，所有治療相關(guān)不良事件均為1/2級(jí)，較常見(jiàn)的包括淋巴細(xì)胞減少癥、疲勞、白細(xì)胞減少癥、發(fā)熱、關(guān)節(jié)痛和皮疹。不良事件的嚴(yán)重程度似乎與劑量無(wú)關(guān)(表1)。截至2020年1月31日中位隨訪47.1周后，12例患者均未顯示治療相關(guān)嚴(yán)重不良事件。

患者接受基因編輯T細(xì)胞治療后的臨床結(jié)果，彩條代表PFS時(shí)間（來(lái)源：Nature Medicine）

有效性方面，研究顯示，基因編輯T細(xì)胞回輸后可在外周血中檢測(cè)到?；颊咧形粺o(wú)進(jìn)展生存期（PFS）為7.7周，中位總生存期為42.6周。無(wú)患者獲得部分緩解，最好的情況是2例患者出現(xiàn)過(guò)病情穩(wěn)定，截至2020年1月31日，所有患者病情進(jìn)展。

脫靶效應(yīng)方面，通過(guò)下一代測(cè)序分析顯示，18個(gè)候選位點(diǎn)中位脫靶事件發(fā)生率為0.05%。

基于以上數(shù)據(jù)，研究者們認(rèn)為，該研究證明了靶向PD-1的CRISPR基因編輯T細(xì)胞在一個(gè)晚期肺癌患者隊(duì)列中的安全性和可行性。然而，考慮到該研究中使用的技術(shù)的局限性，未來(lái)的試驗(yàn)需要使用更優(yōu)化的基因編輯途徑來(lái)提高治療的有效性。

圖片來(lái)源：ASH年會(huì)官網(wǎng)

基因編輯技術(shù)CRISPR為增強(qiáng)人類T細(xì)胞的天然抗癌能力提供了強(qiáng)有力的工具。事實(shí)上，去年11月，美國(guó)首個(gè)CRISPR免疫療法臨床試驗(yàn)（NCT03399448）的數(shù)據(jù)已率先在第61屆美國(guó)血液學(xué)會(huì)（ASH）年會(huì)的摘要中公布。由賓夕法尼亞大學(xué)Perelman醫(yī)學(xué)院的血液學(xué)家Edward Stadtmauer教授領(lǐng)導(dǎo)的研究證實(shí)，利用CRISPR編輯的T細(xì)胞治療癌癥安全性良好。患者在接受治療6個(gè)月后，沒(méi)有明顯的不良反應(yīng)[4]。

癌癥患者中的CRISPR-Cas9工程T細(xì)胞（來(lái)源：Science）

具體來(lái)說(shuō)，Stadtmauer教授團(tuán)隊(duì)首先通過(guò)抽血從3例癌癥患者（2例晚期難治性骨髓瘤患者和1例轉(zhuǎn)移性肉瘤患者）身上提取了T細(xì)胞，然后利用CRISPR技術(shù)對(duì)T細(xì)胞的DNA進(jìn)行改造：刪除TCRα、TCRβ以及PD-1這三個(gè)基因。刪除TCRα和TCRβ可確保T細(xì)胞與癌細(xì)胞的正確部位結(jié)合，刪除PD-1可抑制其阻斷T細(xì)胞發(fā)揮抗癌作用的功能。這些改造完成后，研究人員接著利用慢病毒插入一個(gè)親和力被增強(qiáng)的T細(xì)胞受體基因，使得被基因編輯的T細(xì)胞可靶向癌細(xì)胞上名為NY-ESO-1的抗原（很少有正常組織表達(dá)該抗原）。最后，經(jīng)過(guò)多重改造的T細(xì)胞被回輸?shù)交颊唧w內(nèi)。研究顯示，上述3例患者均對(duì)治療耐受良好。該研究中，脫靶效應(yīng)也很罕見(jiàn)。

NYCE（NY-ESO-1 transduced CRISPR 3X edited）T細(xì)胞回輸后的臨床響應(yīng)和患者結(jié)果（來(lái)源：Science）

療效方面，在3例患者中，研究人員觀察到的最佳響應(yīng)是病情穩(wěn)定。不過(guò)，一個(gè)積極的現(xiàn)象是，所有患者中基因編輯T細(xì)胞均在至少9個(gè)月內(nèi)處于穩(wěn)定水平。Stadtmauer教授表示，在治療9個(gè)月后依然能在患者體內(nèi)看到回輸進(jìn)去的細(xì)胞很令人高興。這表明，這些細(xì)胞可在腫瘤周圍做持續(xù)的監(jiān)測(cè)。

2月6日，這些研究結(jié)果也已正式在發(fā)表于Science雜志上的一篇論文中公布[5]?？茖W(xué)家們認(rèn)為，這些令人鼓舞的結(jié)果為進(jìn)一步開(kāi)展試驗(yàn)調(diào)查基于CRISPR技術(shù)的癌癥免疫療法鋪平了道路。

參考資料：

[1] Chinese scientists to pioneer first human CRISPR trial (來(lái)源：Nature)

[2] CRISPR gene-editing tested in a person for the first time (來(lái)源：Nature)

[3] You Lu et al. Safety and feasibility of CRISPR-edited T cells in patients with refractory non-small-cell lung cancer. Nature Medicine (2020).

[4] Early Results from First-In-U.S. Trial of CRISPR-Edited Immune Cells for Cancer Patients Suggest Safety of Approach（來(lái)源：賓夕法尼亞大學(xué)）

[5] Edward A. Stadtmauer et al. CRISPR-engineered T cells in patients with refractory cancer. Science（2020）.